FocalCheck环形染色荧光微球

FocalCheck荧光微球专门设计用于检查共聚焦激光扫描显微镜的对准，灵敏度和稳定性。它们对于确认三维成像应用中的光学切片厚度（Z分辨率）特别有用。这些聚苯乙烯珠（直径分别为6 µm和15 µm）已经使用专有方法进行了处理，在该方法中，荧光染料只能渗透到微球内的有限深度。所得的珠具有清晰的染料层，当在共聚焦激光扫描显微镜的横截面中观察时，该染料层表现为取决于焦平面的不同尺寸的荧光环（图23.1.4，）。我们将此专有染色程序称为环染色，以将其与整个磁珠的常规染色区分开。

FocalCheck微球有五种不同的荧光染料提供的多种颜色配置：

• 蓝色（365/430 nm）
• 绿色（505/515 nm）
• 橙色（560/580 nm）
• 红色（575/600 nm）
• 深红色（660/680 nm） 

不同污点的激发/发射最大值与共焦激光扫描显微镜中常用的激光源和光学滤光片非常匹配，特别适用于测试和对准具有多条激光线和检测通道的共焦激光扫描显微镜（图23.1） .5）。此外，由于染料位于珠子内，因此不受环境因素的影响，与传统的表面染色珠子相比，FocalCheck微球更亮，光稳定性更高。

FocalCheck产品具有各种不同的颜色配置，包括三种含有微球的悬浮液，这些微球表现出两种或三种不同荧光色的环形染色：

• 蓝荧光和橙荧光环形染料（15 µm，F7234）
• 绿色荧光和深红色荧光环染料（15 µm，F7240）
• 绿色荧光，橙色荧光和深红色荧光环染料（6 µm，F14806； 15 µm，F7235）

我们还提供了四种包含微球的悬浮液，这些微球在整个磁珠中表现出一种荧光色的环形染色和第二种荧光色的染色：

• 贯穿整个过程的绿色荧光环形染色和蓝色荧光染色（6 µm，F14808； 15 µm，F7237）
• 绿色荧光环形染料和深红色荧光染料（15 µm，F7238）
• 整个橙色荧光环染料和蓝色荧光染料（15 µm，F7236）
• 整个过程中为深红色荧光环污渍和绿色荧光污渍（6 µm，F14807； 15 µm，F7239，）

FocalCheck微球体表现出的尖锐的环形污点可以清晰地显示仪器的未对准或其他像差，使其成为共聚焦激光扫描显微镜的参考标准非常理想。当环形染色的FocalCheck珠子的多个环形图像（或环形染色和贯穿整个FocalCheck珠子的组合的环形图像和圆盘图像）在所有尺寸上都完全重合时，则表明图像正确配准（图23.1.4）。